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葡聚糖G-25层析介质(细)图片
产品货号:
GS1579
中文名称:
葡聚糖G-25层析介质(细)
英文名称:
Sephadex G-25 Resin(Fine)
产品规格:
25g|100g|500g
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

Sephadex G-25葡聚糖层析介质是以环氧氯丙烷作为交联剂,通过醚键进行交联的葡聚糖珠状凝胶,是凝胶过滤层析中应用最广的也是用量最大的分离介质。葡聚糖凝胶工作原理是利用具有网状结构的葡聚糖凝胶分子筛作用,根据被分离物质不同分子大小进行分离筛选。大分子物质下移速度最快,最先洗脱下来,中分子物质次之,而小分子能够全部进入层析介质孔中,受到阻力最大,故最后被洗脱下来。Sephadex G-25葡聚糖层析介质分离范围为1~5kD(球形蛋白),主要用于多肽的分离以及大分子蛋白质的脱盐和缓冲液替换。




  • 物理、化学性能稳定
  • 重复利用性能好
  • 高流速、高分辨率、高柱效
  • 可对接常用层析设备



组分25g100g500g
葡聚糖G-25层析介质(细)25g100g500g
说明书1份

保存:2~8℃,不可冻存,有效期3年。


英文名称Sephadex G-25 CoarseSephadex G-25 MediumSephadex G-25 FineSephadex G-25 Superfine
货号GS1453GS1555GS1579GS1584
粒径范围(湿)125~355μm75~250μm25~125μm25~75μm
基质交联葡聚糖
分离球型蛋白分子量范围1000~5000 Da
分离葡聚糖分子量范围100~5000 Da
溶胀因子4~6mL/g
运行流速50~250cm/h
工作温度4~40℃
耐热(pH7.0水中)30min,120℃
耐压0.3MPa
pH稳定性1~14(短时间);2~13(长时间)
pH工作范围2~13
化学稳定性0.2M氢氧化钠(90min);0.1M HCl(2h)
保存液20%乙醇



  • 溶胀
    首次需将干胶颗粒进行溶胀。置于过量的去离子水中,室温下溶胀3h,或者90℃水浴1h。溶胀过程中严禁使用磁力搅拌,以免使微球破碎。
  • 装柱:
    • 根据待分离样品的性质配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。如果是蛋白质等蛋白质的脱盐,一般推荐凝胶层析上样、平衡和洗脱只用一种低盐浓度的缓冲液。如中性附近的50mM Tris-盐酸、PBS缓冲液;如果是多肽的分离,可适当加入0.15M NaCl来屏蔽目标与凝胶的相互作用;如果是缓冲液置换,则根据需要选择目标缓冲液。
    • 将所取凝胶抽干,用初始缓冲液(按凝胶:缓冲液= 3:1的比例)配成匀浆并脱气。
    • 将层析柱垂直固定,底端用水或缓冲液润湿并保持一段液位。
    • 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,使凝胶在柱内自由沉降,水封层析柱,沉降过夜。
    • 连结好柱子顶端活动柱头,打开蠕动泵,用操作流速让缓冲液流过5倍柱体积,再使用1.5倍的操作流速流过5倍柱体积,调节适配柱头,使其尽量贴近胶面,最后用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
      • 所有操作过程不能引入气泡,保证凝胶的均匀度。
  • 平衡:将平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱,观察检测器的变化,直到电导、pH等参数不变。
  • 上样:切换转换阀进行上样,上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,一般而言,样品上样量不超过柱床体积的25%。样品用平衡液配制,用0.45μm微孔滤膜过滤进行预处理。
  • 洗脱:切换到洗脱缓冲液进行恒定洗脱,经过出峰,至基线平衡。
  • 再生:用0.2M NaOH或非离子洗涤剂洗2倍柱体积;接着去离子水冲洗3~5倍柱体积。
  • 保存:使用完毕,将流动相替换为20%乙醇,并保存于4℃冰箱。
  • 为了获得更好的除盐效果,建议不同粒径柱高保持在:粗颗粒在30cm及以上,中颗粒在20cm及以上,细颗粒在10cm及以上,超细颗粒在5cm及以上,颗粒粒径越小分辨率越高,流速越慢。
  • 加样量的多少应根据实验而定,一般最大上样量不超过柱床体积的30%,以10~20%为最佳上样量。
  • 本试剂只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果概不承担责任。

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